sarcome de kaposi et herpèsvirus 8 au cameroun: aspects épidémiologiques, variabilité génétique et clonalité des formes multicentriques et de l'enfant. kaposi sarcoma and human herpes virus 8 in cameroon: epidemiology, genetic variability, and clonality in multicentric forms and the ganglionnic for of the child

le sarcome de kaposi est une tumeur d’origine vasculaire principalement cutanée. une extension ganglionnaire et viscérale, surtout muqueuse est fréquente durant l’évolution tumorale. il représente près de 1% de tous les cancers (>60 000 cas , an). quatre principales formes sont décrites : 1) la forme classique, souvent localisée, survient de façon sporadique surtout chez des hommes âgés, originaires du bassin méditerranéen, 2) la forme endémique, fréquente en afrique centrale et de l’est, avec plusieurs aspects cliniques dont la sévère forme ganglionnaire de l’enfant, 3) la forme iatrogène, survenant surtout chez des patients greffés et 4) la forme épidémique associée au vih, souvent multicentrique disséminée avec extension ganglionnaire et mucosale. l’herpès virus 8 (hhv-8) est l’agent étiologique de cette tumeur, présent dans toutes les formes de sk, l’infection par l’hhv-8 précède l’apparition de la tumeur, ce virus est exprimé surtout de façon latente dans les cellules fusiformes tumorales et certaines formes tumorales de sk sont des proliférations clonales vis-à-vis de ce virus. ce travail épidémiologique et viro-moléculaire concerne le sarcome de kaposi et l’hhv-8. il sera réalisé dans l’unité d’epvo à l’institut pasteur à paris à partir de prélèvements originaires principalement du cameroun. ce travail associe par étape : 1) des études épidémiologiques avec des travaux de terrain et de laboratoire, en particulier une étude de la séroprévalence virale (recherche et détermination du titre des anticorps dirigés contre les antigènes latents et aussi lytiques) dans plusieurs populations rurales originaires de différentes régions du pays). cette étude portera sur plus de 2200 personnes. 2) des études concernant la variabilité génétique de ce virus, en particulier dans le gène transformant codé par l’orf-k1, en comparant des souches virales provenant de populations saines et des virus originaires de prélèvements tumoraux des différentes formes de sarcome de kaposi de l’adulte et de l’enfant. actuellement, les données sur l’afrique centrale sont préliminaires avec uniquement quelques souches connues, dont principalement des souches du sous-type b. notre but est d’obtenir au moins 50, 70 souches virales. les séquences des produits amplifiés, obtenus après pcr à partir du sang périphérique ou de l’adn extrait des biopsies tumorales dans le cadre des sk, seront comparées et analysées au niveau phylogénétique. et 3) des études viro-moléculaires, visant à apprécier la clonalité virale hhv-8 (étude des régions terminales répétées par une méthode associant électrophorèse en champs pulsés, et southern blot) des formes multicentriques, endémiques, mais aussi des formes sévères de l’enfant dont la physiopathologie reste mal connue et dont la clonalité virale et cellulaire n’a pas encore été étudiée. l’unité epvo possède une grande expérience dans ce type d’étude aussi bien épidémiologique que viro-moléculaire, concernant les virus oncogènes (htlv-1, hhv-8 et plus récemment, polyomavirus associé au carcinome de merkel). ces travaux permettront tout d’abord de mieux apprécier certains déterminants épidémiologiques (age, sexe, population, biotope,….) de ce herpèsvirus oncogène dans une région considérée comme fortement endémique. de plus, l’étude d’une série importante de séquences de l’orf-k1 de l’hhv-8 nous permettra de mieux comprendre la diversité génétique virale avec, d’une part, une meilleure connaissance de la biodiversité de ce herpèsvirus dans ces régions très endémiques et d’autre part la possibilité de découvrir de nouveaux variants moléculaires (f), liés soit à une population particulière, soit à une forme spécifique de sk. enfin, l’étude de la clonalité virale des formes multicentriques non vih de ks permettra de mieux comprendre si ces formes disséminées représentent plutôt une prolifération réactionnelle avec une oligo clonalité virale hhv-8 différente des lésions cutanées, comme cela est suggérée dans un nombre non négligeable des lésions du sk associées au vih, ou si les lésions sont plutôt des métastases monoclonales dans le cadre plus typique d’une néoplasie. l’étude des cas de sk de l’enfant de type ganglionnaire, pour lequel aucune étude de ce type n’a été réalisée, s’inscrit dans la même problématique.

context: kaposi sarcoma is a cutaneous cancer originating from vascular endothelial cells. it can spread to viscera and lymph nodes during the course of the disease. ks accounts for about 1% of all cancers worldwide (>60 000 cases, year). four epidemiological features of the disease are described: 1) the classical and clinically localised form occurs in aged mediterranean men. 2) the endemic form is current in central and eastern africa, and shows with several clinical features including the severe ganglionic form of the child. 3) the iatrogenic for is associated to transplant patients and 4) the endemic form which is associated to hiv is often disseminated to lymph nodes and mucosa. human herpesvirus 8 (hhv-8) is the aetiological agent of this tumor and is found in all forms of ks. hhv-8 infection occurs prior to the onset of the tumor. mostly latent expression of the virus is found in tumoral fuse cells and most of the tumoral cells in ks are known to be clonal proliferations. project description this work concerns the epidemiology of kaposi sarcoma and the associated virus hhv-8 and is performed in “institut pasteur, unité d’epidémiologie et physiopathologie des virus oncogènes”. samples used in this work mostly originate from cameroon, based on preliminary works and findings by our lab in that highly endemic area for both the tumor and this oncogenic virus. different phases were followed: 1) epidemiology works was done, including field works, and viral seroprevalence analysis, based on detection and titration of antibodies directed against latent and lytic antigens in various ethnic and geographic rural populations of the country. this study will include over 2200 persons. 2) works on genetic variability of the virus then followed, based on the transforming gene encoded by orf-k1. viral strains from healthy populations were compared to tumoral strains from different forms of ks in adult and children. data on central africa are still preliminary and only few strains from the b sub-type are known. we intend to find 50, 70 new strains. dna was amplified from buffy coat and tumor biopsies. all sequences from amplified products underwent phylogenetic analysis. 3) finally, virological and molecular studies will be done regarding hhv-8 clonality (terminal repeats using pulsed field electrophoresis and southern blot) in multicentric endemic forms, as well as in the severe forms of the child. pathophysiology and clonality in this forms is still to be studied. our lab has acquired a great experience concerning the epidemiological, virological and molecular studies on oncogenic viruses, first with htlv-1 and hhv-8, and more recently with polyomavirus associated to merkel carcinoma. expected results first of all, this study will help us appreciate epidemiological factors such as age, sex, population and environment, regarding this oncogenic virus in a highly endemic area. moreover, studying a large number of sequences on the orf-k1 of the hhv-8, will help us to better understand the genetic variability of the virus, its biodiversity in this highly endemic area, and possibly the discovery of new molecular strains (f) which may be associated to a specific population or ks form. studying viral clonality in multicentric non hiv forms of ks, will allow us to understand wether they are reactional proliferations with oligo clonality of hhv-8 as suggested in numerous hiv associated ks, or lesions are monoclonal metastasis as in a typical neoplasia. studying ganglionic form of the child follow the same objectives since no such study has yet been done.